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干擾素γ (interferon γ,IFN γ), 是II型干擾素的唯一成員,是一種水溶性二聚體細胞因子,主要由CD8+ T細胞、Th1 CD4+ T細胞、自然殺傷細胞(NK)和自然殺傷T細胞(NKT)在各種刺激下分泌。IFN γ通過抑制Th2細胞分化,刺激Th1細胞增殖,促進巨噬細胞活化,誘導II 型主要組織相容性復合物(MHC II)表達,具有廣泛的生物學功能,如抗病毒、 抗腫瘤、免疫調節(jié)等。干擾素-γ對抵抗病毒、某些細菌和原生動物感染的固有免疫和適應性免疫具有重要作用。在很多不同病理情況下包括感染、自身免疫疾病、移植排斥、過敏反應和糖尿病中,IFN γ可作為疾病標志物。
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法定量測定人血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的IFN-γ含量。本試劑盒采用高親和力的抗人IFN-γ抗體預包被酶標板,將標準品/待測樣本和生物素標記的抗人IFN-γ檢測抗體同步加入微板孔中,經過孵育后樣本中存在的IFN-γ會與酶標板上的預包被抗體和檢測抗體特異性結合。洗滌去除未結合物后,將辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)加至微孔板中并孵育,通過檢測抗體上的生物素和鏈霉親和素發(fā)生的高強度非共價結合,形成“包被抗體-人IFN-γ蛋白-檢測抗體-Streptavidin-HRP”免疫復合物。再次洗滌后,將顯色底物TMB加至微板孔中,HRP會催化TMB底物生成藍色產物,顏色反應的深淺將與樣本中IFN-γ的濃度成正相關。而后加入終止液終止反應,在450 nm波長(參考波長570 - 630 nm)處測定吸光度值。通過繪制標準曲線,由樣本吸光度值可計算出樣本中所含IFN-γ濃度。本試劑盒特異性強、檢測靈敏度高,同時操作更加便捷。